Keywords：NK细胞分离；NK细胞分选；磁珠分选NK细胞；NK细胞冻存液；NK细胞培养基；NK细胞扩增培养基；NK细胞扩增试剂盒；自然杀伤细胞；细胞治疗；NK细胞治疗；Isolation of NK Cells；NK Cell Sorting；Magnetic Bead-Based NK Cell Isolation；NK Cell Cryopreservation Medium；NK Cell Culture Medium；NK Cell Expansion Medium；NK Cell Expansion Kit；Natural Killer cells；NK Cells; Cell Therapy；NK Cell Therapy； CAR-NK;

在肿瘤免疫治疗、抗病毒药物开发、自身免疫疾病研究等领域，自然杀伤细胞（Natural Killer Cells, NK cells）正逐渐从幕后走向台前。作为先天免疫系统的核心成员，NK细胞凭借其独特的"快速杀伤"能力和"无需预敏"的特性，成为药物研发中不可或缺的关键角色。因此，高纯度NK细胞至关重要，IPHASE人NK细胞阴选试剂盒应运而生。

01 NK细胞的生理特性

自然杀伤细胞（Natural Killer cells，NK cells）不仅是免疫系统的"第一道防线"，更是药物研发的关键突破口。

NK细胞具有独特的免疫识别机制，不同于T细胞依赖的MHC呈递抗原，NK细胞通过“丢失自我”和“诱导自我”机制识别靶细胞，使其在肿瘤异质性环境中具有广谱杀伤优势；此外，自然杀伤细胞（Natural Killer cells，NK cells）精准调控激活性受体（NKG2D、NCRs、CD16）和抑制性受体（KIRs、NKG2A）的动态平衡，为药物开发提供多个可干预靶点。NK细胞的功能也多种多样。已有研究表明，NK细胞通过穿孔素/颗粒酶途径和死亡受体途径（FasL/Fas、TRAIL/DR4/5）诱导靶细胞凋亡，产生直接细胞毒作用；其分泌IFN-γ、TNF-α、GM-CSF等细胞因子来调节免疫微环境，并具有适应性免疫特征，为长效疫苗开发提供新思路。

正因为NK细胞的独特生理特性，其在抗体药物（Antibody Drugs）开发、细胞治疗（Cell therapy）领域及小分子药物筛选等三面具有不可替代的优势。

【抗体药物（Antibody Drugs）开发】

·抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（Antibody-Dependent Cell mediated Cytotoxicity，ADCC）效应优化平台

① CD16A（FcγRIIIa）多态性（158V/F）对单抗疗效的影响评估

② Fc段工程化改造（如糖基化修饰、氨基酸突变）的体外验证系统

③双特异性抗体（如CD16×CD30、CD16×BCMA）的效价测定

·检查点抑制剂研究

①NK细胞特异性检查点（NKG2A/HLA-E、KIR/HLA-C）抑制剂开发

②PD-1/PD-L1抗体对NK细胞功能的交叉影响评估

【细胞治疗领域】

·CAR-NK技术突破

①第二代CAR设计（整合IL-15表达、自杀基因开关）

②异体通用型解决方案（CRISPR敲除HLA-I/CD38避免排斥）

③冷冻保存技术对细胞活性的影响研究

·体外扩增工艺开发

①不同细胞因子组合（IL-2/IL-15/IL-21）的增殖效率比较

②饲养细胞（如K562-mbIL21）与无饲养体系的效果评估

③代谢调控（如谷氨酰胺依赖性）研究

【 小分子药物筛选】

·NK细胞激活剂开发

①小分子TLR激动剂（如TLR8激动剂VTX-2337）

②表观遗传调节剂（HDAC抑制剂增强NKG2D配体表达）

·免疫代谢调控

①mTOR抑制剂对NK细胞记忆形成的影响

②缺氧条件下NK细胞功能维持策略

简而言之，NK细胞已从单纯的效应细胞发展为药物研发的"多功能平台"，其应用贯穿靶点发现、药物筛选、临床前评价到治疗方案优化全流程。因此，合适的NK细胞分选技术在NK细胞应用上显得至关重要！

02 IPHASE NK细胞阴选试剂盒解锁免疫治疗药物研发的关键钥匙

随着NK细胞在免疫治疗中的地位日益凸显，尤其是在通用型细胞治疗（Cell Therapy）领域的巨大潜力，对高质量、标准化NK细胞来源的需求将持续激增。然而，通过密度梯度离心法或阳性分选法等传统分选法获得的NK细胞，其结果却不尽人意。

纯度低：通过密度梯度离心等方法获得的PBMC中，NK细胞占比仅5%-15%，杂质细胞干扰严重。

耗时费力：多步骤操作流程冗长，极大消耗研究人员的时间与精力。

批次差异不稳定：手工操作难以保证分离结果的一致性，影响实验可重复性。

可能活化：某些阳性分选方法可能激活NK细胞，改变其天然状态。

这些痛点直接制约着药物研发中对NK细胞功能、药效及安全性评价的准确性。因此，合适的NK细胞分离（Isolation of NK Cells）或NK细胞分选（NK Cell Sorting）技术显得至关重要！鉴于此IPHASE作为体外研究生物试剂引领者，研发了人NK细胞阴选试剂盒，该试剂盒基于磁珠分选法(Magnetic Activated Cell Sorting, MACS)的原理，采用“排除法”策略，特异性去除PBMC中不需要的细胞类型（如T细胞、B细胞、单核细胞、树突细胞、血小板等），从而富集高纯度的未活化的磁珠分选NK细胞（Magnetic Bead-Based NK Cell Isolation），是目前效率最高的分选方法。

阴性分选（Negative Selection）其革命性意义体现在高纯度、非活化、高效性和稳定性等四个方面！

高纯度：阴性分选（Negative Selection）得到的NK细胞轻松实现>90%纯度，极大降低杂质干扰。

天然状态：阴性分选不依赖NK细胞表面标志物，避免抗体结合导致的非预期活化，保留细胞原始状态。

高效便捷：简化操作流程（通常1-2小时内完成），显著提升实验效率。

稳定可靠：试剂盒标准化生产，保证不同实验间、不同批次间结果的高度一致性。

IPHASE人NK细胞阴选试剂盒，以1×10^7个细胞为一个test，分别有10test和100test两个规格，可供客户从外周血单个核细胞中进行NK细胞的分选，并对其进行严格的质量把控，包括细胞活率和细胞纯度两方面。下图为IPHASE技术人员使用流式细胞仪记录使用人NK细胞阴选试剂盒分选出的人NK细胞的纯度变化，可以观察到在分选前NK细胞在PBMC中的占比为10.6%，分选后NK细胞的纯度提高到90.4%，其活率为92.5%，满足客户研究需求，说明IPHASE 人NK细胞阴选试剂盒是免疫治疗药物开发不可或缺的“好伴侣”！

IPHASE还已生产出相应的NK细胞培养基（NK Cell Culture Medium）、NK细胞冻存液（NK Cell Cryopreservation Medium）、NK细胞扩增培养基（NK Cell Expansion Medium）和NK细胞扩增试剂盒（NK Cell Expansion Kit），助力于客户的NK细胞治疗（NK Cell Therapy），如CAR-NK。且除了NK细胞阴选试剂盒外，小鼠NK细胞阴选试剂盒，同时针对猴、大鼠、犬等种属均在陆续开发中，请各位客户敬请期待......此外，IPHASE各种属阳选试剂盒、适配体阳选及无痕分选试剂盒均已开发成功，具体产品及规格如下表所示：